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HA-VSMC細(xì)胞，人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟
發(fā)表時(shí)間：2026-01-13
HA-VSMC細(xì)胞的培養(yǎng)其實(shí)不難，掌握這幾個(gè)關(guān)鍵步驟就能搞定：
一、培養(yǎng)基與環(huán)境
?培養(yǎng)基?：DMEM/F12 + 10%胎牛血清 + 1%雙抗
?環(huán)境?：37℃、5%CO?、濕度70%-80%
二、復(fù)蘇與傳代
?復(fù)蘇?：37℃水浴解凍后離心，用完全培養(yǎng)基重懸
?傳代?：細(xì)胞長(zhǎng)到80%密度時(shí)，用PBS潤(rùn)洗后胰酶消化，離心后按1:2比例分瓶
三、凍存與保存
?凍存液?：90%完全培養(yǎng)基 + 10% DMSO
?降溫?：-20℃ 1.5h → -80℃過(guò)夜 → 液氮長(zhǎng)期保存
?消化控制?：胰酶時(shí)間2-3分鐘，避免過(guò)度
?碎片處理?：運(yùn)輸后可離心去除碎片
一、培養(yǎng)基與環(huán)境
?培養(yǎng)基?：DMEM/F12 + 10%胎牛血清 + 1%雙抗
?環(huán)境?：37℃、5%CO?、濕度70%-80%
二、復(fù)蘇與傳代
?復(fù)蘇?：37℃水浴解凍后離心，用完全培養(yǎng)基重懸
?傳代?：細(xì)胞長(zhǎng)到80%密度時(shí)，用PBS潤(rùn)洗后胰酶消化，離心后按1:2比例分瓶
三、凍存與保存
?凍存液?：90%完全培養(yǎng)基 + 10% DMSO
?降溫?：-20℃ 1.5h → -80℃過(guò)夜 → 液氮長(zhǎng)期保存
表型維持的“避坑指南”
四、注意事項(xiàng)
?無(wú)菌操作?：全程嚴(yán)格消毒?消化控制?：胰酶時(shí)間2-3分鐘，避免過(guò)度
?碎片處理?：運(yùn)輸后可離心去除碎片
